Cypex---CYP100系列產(chǎn)品知識(shí)介紹

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貨號(hào)： CYP100

產(chǎn)品描述：在大腸桿菌中表達(dá)的人SULT1A1 * 1

量： 1毫克蛋白質(zhì)

儲(chǔ)存緩沖液： 10 mM磷酸鈉（pH 7.4），140 mM NaCl

儲(chǔ)存：儲(chǔ)存于-80°C。避免頻繁的溫度變化。在冰上解凍。

預(yù)期用途：僅用于實(shí)驗(yàn)室（研究）目的

典型批次特征

蛋白質(zhì)濃度： 10 mg / ml

典型活動(dòng)數(shù)據(jù)（1）

底物： 4-硝基苯酚

與時(shí)間線性相關(guān)： 10分鐘

活性： 10 nmol / min / mg蛋白質(zhì)（在4 µM 4-硝基苯酚中）

典型活動(dòng)數(shù)據(jù)（2）

底物： 4-甲基傘形酮

線性與時(shí)間長(zhǎng)達(dá)： 6分鐘

線性，蛋白質(zhì)最高： 8 µg / ml

Vmax： 8 nmol / min / mg蛋白質(zhì)

Km： 1 µM

含量：

SULT1A1 QC分析

活性：4-硝基苯酚磺基轉(zhuǎn)移酶

孵育條件

試驗(yàn)緩沖液：0.05M磷酸鹽鉀pH 7.4，5毫摩爾MgCl 2，10毫摩爾二硫蘇糖醇

溫育體積：200微升

終止試劑：乙腈（100微升）

HPLC條件

色譜柱：Hypersil ODS（5 µm）250 x 4 mm

溫度：30°C

流動(dòng)相：5％三乙胺（pH值為3，H3PO4）/乙腈66/34（v / v）（等度）

流速：1.0 ml / min

運(yùn)行時(shí)間：10.0 min進(jìn)

樣量：100 µl

檢測(cè)：UV，λ= 280 nm

保留時(shí)間：

4-硝基苯硫酸鹽4.2分鐘

4-硝基苯酚5.2分鐘

活性：4-甲基傘形酮磺基轉(zhuǎn)移酶

孵育條件

試驗(yàn)緩沖液：0.05M磷酸鹽鉀pH 7.4，5毫摩爾MgCl 2，10毫摩爾二硫蘇糖醇

溫育體積：200微升

終止試劑：乙腈（100微升）

HPLC條件

色譜柱：Hypersil ODS（5 µm）250 x 4 mm

溫度：30°C

流動(dòng)相：50 mM乙酸銨，50 mM四丁基銨（pH 3.6）/

乙腈; 54/46（v / v）（等度）

流速：1.0 ml / min

運(yùn)行時(shí)間：7.0 min進(jìn)

樣量：100 µl

檢測(cè)：熒光λ（ex）= 315 nm，λ（em）= 375 nm

保留時(shí)間：

4-甲基傘形酮3.3分鐘

4-甲基傘形硫酸鹽4.3分鐘

細(xì)菌小體，含有重組酶（與還原酶，CES，ALDH等共表達(dá)的CYP）的細(xì)菌膜，以及我們的細(xì)胞溶質(zhì)酶組合，涵蓋了涉及藥物代謝的多種蛋白質(zhì)。

自開(kāi)發(fā)以來(lái)，我們的產(chǎn)品已被證明是藥物代謝研究中使用的工具的一種非常可靠的經(jīng)濟(jì)高效的補(bǔ)充。

我們的產(chǎn)品用于生成可靠的體外數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)與開(kāi)發(fā)藥物如何在人體內(nèi)分解有關(guān)，從而減少了后期藥物試驗(yàn)失敗的成本。

使用我們的產(chǎn)品產(chǎn)生的數(shù)據(jù)通常會(huì)在提交監(jiān)管機(jī)構(gòu)的過(guò)程中使用。

我們的重組酶與體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的相同。使用我們的Bactosome產(chǎn)品可補(bǔ)充肝微粒體，并提供有關(guān)代謝機(jī)制的更多見(jiàn)解。

我們的產(chǎn)品均按照ISO 9001質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制造，可產(chǎn)生一致且穩(wěn)定的結(jié)果。

我們的動(dòng)物酶可以在選擇人類(lèi)藥物測(cè)試物種之前用于體外，以確保選擇最合適的物種。

我們的專(zhuān)業(yè)知識(shí)擴(kuò)展到農(nóng)用化學(xué)品開(kāi)發(fā)，有助于確保農(nóng)藥影響害蟲(chóng)，而不是產(chǎn)品。

大鼠CYP1A2LR細(xì)菌小體

貨號(hào)： CYP364

產(chǎn)品描述：大鼠CYP1A2和大鼠CYP還原酶在大腸桿菌中共表達(dá)

數(shù)量： 1 nmol細(xì)胞色素P450

儲(chǔ)存緩沖液： 50 mM Tris-乙酸鹽（pH 7.6），250 mM蔗糖，0.25 mM EDTA

儲(chǔ)存：儲(chǔ)存于-80°C。避免頻繁的溫度變化。在冰上解凍。

預(yù)期用途：僅用于實(shí)驗(yàn)室（研究）目的

典型批次特征

P450濃度： 10 nmol / ml

蛋白質(zhì)濃度： 16 mg / ml

P450含量：  625 pmol / mg蛋白質(zhì)

細(xì)胞色素c還原酶活性： 2100 nmol / min / mg蛋白質(zhì)

典型的P450活動(dòng)數(shù)據(jù)

活性： 7-乙氧基試鹵靈O-脫乙基酶

線性時(shí)間： 90秒

含量：

大鼠CYP1A2 QC分析

活性：7-乙氧基試鹵靈O-脫乙基酶

孵育條件

測(cè)定緩沖液：0.1 M磷酸鉀pH 7.4，5 mM MgCl 2

孵育體積：200 µl

終止劑：甲醇（100 µl）

內(nèi)標(biāo)：無(wú)

HPLC條件

色譜柱：Hypersil ODS（5 µm）250 x 4 mm

溫度：35°C

流動(dòng)相：20 mM磷酸鉀pH 7 /甲醇58/42（v / v）（等度）

流速：1.0 ml / min

運(yùn)行時(shí)間：5.5分鐘進(jìn)

樣量：75 µl

檢測(cè)：熒光λ（ex）= 530 nm，λ（em）= 580 nm

保留時(shí)間：

試鹵靈4.0分鐘

貨號(hào) 名稱(chēng) 規(guī)格

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我們利用生產(chǎn)人類(lèi)藥物代謝酶的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，引入了用于獸藥開(kāi)發(fā)的一系列動(dòng)物等效物。

我們所有產(chǎn)品的制造均遵循嚴(yán)格的ISO9001質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并提供可靠且具有成本效益的資源，通過(guò)在早期階段突出代謝相關(guān)的負(fù)債來(lái)幫助減輕后期的失敗。

我們開(kāi)發(fā)了基于酶的快速酶標(biāo)儀的熒光抑制篩選測(cè)定法，證明了它們的易用性和可產(chǎn)生的豐富數(shù)據(jù)。

熒光測(cè)定法的發(fā)展，用于測(cè)定NCEs的IC50值。

犬類(lèi)細(xì)胞色素P450，結(jié)合IC50隨時(shí)間變化以預(yù)測(cè)時(shí)間/

代謝依賴(lài)性抑制。

M.W.，Macintyre，G.M.M。和Pritchard，M.P。

Cypex Ltd，鄧迪，湯姆·麥克唐納大街6號(hào)，DD2 1NH，英國(guó)

盡管人類(lèi)異種生物代謝的途徑已被很好地表征，但在人類(lèi)中，異源代謝的途徑卻很少。

藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中使用的動(dòng)物模型。犬模型通常用于預(yù)測(cè)

新化合物在人類(lèi)中的行為，但CYP介導(dǎo)的新陳代謝之間的差異

已經(jīng)顯示了兩種（例如Chauret等人，細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的體外比較

人，狗，貓和馬的新陳代謝活動(dòng)。 （1997）Drug Met。顯示25（10）1130-1136和

Martignoni等人，小鼠，大鼠，狗，猴子和人類(lèi)CYP介導(dǎo)的物種差異

藥物代謝，抑制和誘導(dǎo)。 （2006）Expert Opin。藥品。代謝。 2（6）875-894）。

當(dāng)使用新化合物時(shí)，這些差異可能會(huì)導(dǎo)致誤導(dǎo)或無(wú)法解釋的結(jié)果

使用犬模型開(kāi)發(fā)。在這里，我們開(kāi)發(fā)了一種快速，簡(jiǎn)單，基于熒光的

分析以尋找新化合物抑制一系列犬CYP（包括CYP）的潛力

3A，1A，2D和2C）。該檢測(cè)方法基于Cypex對(duì)人CYP的熒光抑制篩選

并允許在人和犬的CYP之間進(jìn)行比較。包括經(jīng)過(guò)測(cè)試的基材

二乙氧基熒光素（DEF），7-乙氧基間苯二酚（7-ER），7-芐氧基喹啉（7-BQ），

7-甲氧基-4-氨基甲基（MAMC），7-甲氧基-4-三氟甲基（MFC）和

3-氰基-7-乙氧基（CEC）。對(duì)于每種CYP，一組十種已知的人類(lèi)CYP抑制劑是

進(jìn)行測(cè)定，并將IC50與人CYP獲得的IC50進(jìn)行比較。獲得的信息

通過(guò)使用新化合物運(yùn)行此類(lèi)屏幕將有助于突出顯示之間的任何差異

人和犬的CYP介導(dǎo)的新陳代謝，當(dāng)化合物移入犬模型，導(dǎo)致數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。

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